β-半乳糖苷酶（β-GAL）測定試劑盒 微量法

產(chǎn)品內(nèi)容： 提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。 試劑一：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入 2.5mL 雙蒸水，充分溶解備用；用不完的試 劑仍-20℃保存。 試劑二：液體 4mL×1 瓶，4℃保存。 試劑三：液體 15mL×1 瓶，4℃保存。 標(biāo)準(zhǔn)液：液體 1mL×1 支，4℃保存，5μmol/mL 對硝基苯酚溶液。

產(chǎn)品說明： β-GAL(EC3.2.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，能夠催化β半乳糖苷化合物 中β半乳糖苷鍵水解，此外還具有轉(zhuǎn)半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長釋放儲存的能 量，還能在正常的多糖代謝、細(xì)胞壁組分代謝以及衰老時細(xì)胞壁降解過程中催化多糖、糖蛋白以及 半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解，釋放自由的半乳糖。 β-GAL 分解對-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基苯酚，后者在 400nm 有大吸收峰，通過 測定吸光值升高速率來計算β-GAL 活性。 試

驗中所需的儀器和試劑： 可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研 缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、粗酶液提?。?1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每 500 萬細(xì)菌或細(xì) 胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復(fù) 30 次），15000g，4℃，離心 20 分鐘，取上清，置冰上待測。 2、組織的處理：稱取約 0.2g 組織，加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿；15000g，4℃，離心 20 分鐘， 取上清，置冰上待測。 3、標(biāo)準(zhǔn)液的處理：用蒸餾水將標(biāo)準(zhǔn)液稀釋 200、100、50、25、12.5、6.25、0nmol/mL.

相關(guān)文獻：

《Exosomes from hyperglycemia-stimulated vascular endothelial cells contain versican that regulate calcification/senescence in vascular smooth muscle cells》 作者:Shuang Li?, Jun-Kun Zhan?, Yan-Jiao Wang, Xiao Lin, Jia-Yu Zhong, Yi Wang, Pan Tan, Jie-Yu He, Xing-Jun Cui, Yi-Yin Chen, Wu Huang and You-Shuo Liu 期刊:Cell & Bioscience 影響因子:3.405 PMID:30622695
《Apple fruit acidity is genetically diversified by natural variations in three hierarchical epistatic genes: MdSAUR37, MdPP2CH and MdALMTII》 作者:Dongjie Jia,Fei Shen,Yi Wang,Ting Wu,Xuefeng Xu,Xinzhong Zhang,Zhenhai Han 期刊:Plant Journal 影響因子:5.726 PMID:29750477
 

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