游離膽固醇（FC）含量測定試劑盒 微量法

測定意義：FC是構(gòu)成細胞膜的主要成分，也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。 
測定原理： FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2，過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物，在500nm有吸收峰，其顏色深淺與FC含量成正比。 
自備儀器和用品：水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。 

                                 游離膽固醇（FC）含量測定試劑盒 微量法
                                                                                                        分光光度法
注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

貨號：BC1895

規(guī)格：100管/96樣

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：異丙醇50mL（自備）；

工作液：液體50mL×1瓶，4℃保存；

標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，濃度為5μmol/mL，4℃保存。

產(chǎn)品說明： FC是構(gòu)成細胞膜的主要成分，也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活 性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。

測定原理： FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯 酮和H2O2，過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物，在500nm有吸收峰， 其顏色深淺與FC含量成正比。 自備儀器和用品： 水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計、石英比色皿、異丙醇和蒸餾水。

操作步驟：

一、FC的提取：

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL 試劑一）進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細 胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲2秒，間隔3秒，總時間3min）； 然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。

3. 血清（漿）樣品：直接測定。

二、測定操作：

1. 分光光度計預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長到 500nm，蒸餾水調(diào)零。

2. FC 工作液在 40℃水浴中預(yù)熱 30min。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管：依次在 1ml 玻璃比色皿中加入 20μLFC 標(biāo)準(zhǔn)液和 980μLFC 工作液，5min 后于 500nm 測定 A 標(biāo)準(zhǔn)管。 標(biāo)準(zhǔn)管只需做 1-2 個。

4. 測定管：依次在 1ml 玻璃比色皿中加入 20μLFC 測定液和 980μLFC 工作液，5min 后于 500nm 測定 A 標(biāo)準(zhǔn)管。

 相關(guān)文獻:

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《Characterization, in vitro binding properties, and inhibitory activity on pancreatic lipase of β-glucans from different Qingke (Tibetan hulless barley) c*rs》 作者:Huan Guo，Shang Lin，MinLua Jia Duo Bu Gong，Lu Wang，Qing Zhang，De-Rong Lin，Wen Qin，Ding-Tao Wu 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30195000